RESUMEN
Human menstrual blood-derived mesenchymal stromal cells (MenSCs) have become not only an important source of stromal cells for cell therapy but also a cellular source for neurologic disorders in vitro modeling. By using culture protocols originally developed in our laboratory, we show that MenSCs can be converted into floating neurospheres (NSs) using the Fast-N-Spheres medium for 24-72 h and can be transdifferentiated into functional dopaminergic-like (DALNs, ~ 26% TH + /DAT + flow cytometry) and cholinergic-like neurons (ChLNs, ~ 46% ChAT + /VAChT flow cytometry) which responded to dopamine- and acetylcholine-triggered neuronal Ca2+ inward stimuli when cultured with the NeuroForsk and the Cholinergic-N-Run medium, respectively in a timely fashion (i.e., 4-7 days). Here, we also report a direct transdifferentiation method to induce MenSCs into functional astrocyte-like cells (ALCs) by incubation of MenSCs in commercial Gibco® Astrocyte medium in 7 days. The MSC-derived ALCs (~ 59% GFAP + /S100ß +) were found to respond to glutamate-induced Ca2+ inward stimuli. Altogether, these results show that MenSCs are a reliable source to obtain functional neurogenic cells to further investigate the neurobiology of neurologic disorders.
Asunto(s)
Linaje de la Célula/fisiología , Transdiferenciación Celular/fisiología , Neuronas Colinérgicas/fisiología , Neuronas Dopaminérgicas/fisiología , Menstruación/fisiología , Células Madre Mesenquimatosas/fisiología , Adolescente , Adulto , Células Cultivadas , Femenino , Humanos , Adulto JovenRESUMEN
Objetivo: Evaluar la validez diagnóstica de las pruebas inmunológicas en la infección por Paracoccidioides, a partir de un metaanálisis de la literatura publicada entre 1972-2017. Métodos: Se realizó un metanálisis según las fases de identificación, tamización, elección e inclusión descritas en la guía PRISMA. Se evaluó la calidad metodológica con la guía QUADAS y se garantizó la reproducibilidad en la selección de estudios y extracción de la información. Se estimó la sensibilidad, especificidad, razones de verosimilitud, OR diagnóstica y área bajo la curva ROC usando Meta-DiSc. Resultados: Se identificaron 21 estudios que evaluaron 32 pruebas diagnósticas con una población de 1.404 individuos sanos, 2.415 con otras infecciones y 2.337 con Paracoccidioides. La mayoría de pacientes son de Brasil y Colombia. Las pruebas analizadas incluyen inmunodifusión, western blot, ELISA, aglutinación en látex. Las pruebas presentaron una sensibilidad y especificidad superior al 90%, razón de verosimilitud positiva y negativa de 24,7 y 0,08 respectivamente. La OR diagnóstica fue 495,9 y el área bajo la curva de 0,99. En la meta-regresión por tipo de antígeno se encontró que las mezclas de antígenos y el gp43 presentaron resultados satisfactorios en todos los parámetros; por su parte, los que utilizaron el antígeno p27 no presentaron resultados aceptables en ninguno de los parámetros. Conclusión: La elevada validez diagnóstica hallada en las pruebas serológicas que utilizan mezclas de antígenos o gp43 purificada evidencia la pertinencia de su uso en clínica y en programas de tamización.
Objective: To evaluate the diagnostic validity of the immunological tests in Paracoccidioides infection, from a meta-analysis of the literature published between 1970-2017. Methods: Meta-analysis according to the identification, screening, eligibility and inclusion phases of PRISMA. The methodological quality was evaluated with the QUADAS guide and the reproducibility in the selection of studies and extraction of the information was guaranteed. Sensitivity, specificity, likelihood ratios, diagnostic OR and area under the ROC curve were estimated using Meta-DiSc. Results: We identified 21 studies that evaluated 32 diagnostic tests with a population of 1404 healthy individuals, 2415 with other infections and 2337 with Paracoccidioides. The majority of patients are from Brazil and Colombia. The tests analyzed include immunodiffusion, western blot, ELISA, latex agglutination. The tests presented a sensitivity and specificity higher than 90%, positive and negative likelihood ratio of 24,7 and 0,08 respectively. The diagnostic OR was 495,9 and the area under the curve was 0,99. In the meta-regression by type of antigen it was found that mixtures of antigens and gp43 showed satisfactory results in all parameters; those who used the p27 antigen did not present acceptable results in any of the parameters. Conclusion: The diagnostic validity of the serological tests using mixtures of antigens or purifed gp43 is clinically similar, for the other antigens the validity was scarce.
